細胞爬片制備中常見問題及解決方案

　　蓋玻片與細胞爬片的區別

　　材質與設計?

　　蓋玻片：普通玻璃材質，需手動剪裁或處理(如酸洗、高壓滅菌)。

　　細胞爬片：專用玻片，表面經TC處理或陽離子電荷修飾，可直接貼附細胞，無需額外包被。

　　使用場景?

　　蓋玻片：通用性強，但需預處理，適合簡單實驗。

　　細胞爬片：專為細胞培養優化，貼壁更牢固，適合免疫熒光、凋亡檢測等高精度實驗。

　　操作便捷性?

　　蓋玻片：操作繁瑣(如酸洗、滅菌)，易產生氣泡或脫片。

　　細胞爬片：開包即用，減少預處理步驟，實驗效率更高。

　　細胞爬片制備步驟

　　玻片處理?

　　酸泡24小時，流水沖洗，蒸餾水浸泡，高壓滅菌。

　　或用70%乙醇浸泡后火焰烤干(少量玻片)?。

　　細胞接種?

　　貼壁細胞：將玻片放入培養皿，接種細胞懸液，靜置30分鐘?。

　　懸浮細胞：直接滴加細胞懸液，靜置4小時?。

　　固定與保存?

　　4%多聚甲醛固定10-20分鐘，PBS輕柔洗滌。

　　避免干燥，及時固定或染色?。

　　常見問題及解決方案

　　脫片?

　　原因：細胞附著力差、洗滌過猛、固定不當?。

　　解決：使用多聚賴氨酸包被玻片，優化PBS沖洗方式?。

　　背景高?

　　原因：封閉不充分、抗體濃度過高?。

　　解決：延長封閉時間，調整抗體稀釋比例?。

　　細胞貼壁不均?

　　原因：玻片未處理或細胞密度過高?。

　　解決：用多聚賴氨酸包被，控制細胞密度?。

　　注：以上僅供參考，本試劑僅供科研使用，不作為實際數據，實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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