Elisa實驗：如何判斷酶標(biāo)板是否失效?

　　以下是天津本生判斷酶標(biāo)板是否失效的全面檢測方法及標(biāo)準，涵蓋物理檢查、功能測試和實驗驗證：

　　一、?物理檢查?

　　外觀檢測?

　　觀察板孔是否有劃痕、變形或污染，破損的板孔會導(dǎo)致液體分布不均。

　　檢查密封性：未密閉保存的酶標(biāo)板可能因吸附水分或干燥失效。

　　透光率測試?

　　用酶標(biāo)儀檢測空板吸光度(主波長450nm，參考波長630nm)，若透光率不均(CV值>10%)提示板子性能下降。

　　二、?功能驗證?

　　蛋白吸附能力測試?

　　包被50μg/mL IgG過夜，BCA法檢測吸附前后蛋白濃度差，吸附量下降>20%表明板子失效。

　　空白值檢測?

　　加入緩沖液后測OD值，空白孔OD>0.2(夾心法)提示非特異性吸附增加。

　　三、?實驗驗證?

　　標(biāo)準曲線測試?

　　使用已知濃度標(biāo)準品檢測，若線性相關(guān)系數(shù)(R值)<0.99或梯度顯色異常，提示板子失效。

　　復(fù)孔CV值>8%表明板孔間一致性差。

　　顯色反應(yīng)驗證?

　　正常TMB底物顯色應(yīng)為藍色→黃色(終止后)，若顯色延遲或顏色異常需更換板子。

　　四、?保存條件追溯?

　　商品化板需4℃密閉保存，自包被板有效期更短;若長期暴露于高溫或濕度>60%環(huán)境，建議棄用。

　　五、?操作對照?

　　同步使用新板對比檢測，若舊板結(jié)果偏差>15%則判定失效。

　　通過以上方法可綜合評估酶標(biāo)板狀態(tài)，失效板需及時更換以避免實驗誤差。

　　注：以上資料僅供參考，如需更詳細說明，可參考具體品牌商附帶產(chǎn)品信息。

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